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| Cat. Number | HC23EH |
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| Chemical Name | T7高产量RNA合成试剂盒 T7 High Yield RNA Synthesis Kit |
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| Qty 1 |
50T |
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| Qty 2 | 100T |
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| Storage condition | -20℃保存 |
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| Stability | 有效期两年。 |
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| References | T7高产量RNA合成试剂盒 T7 High Yield RNA Synthesis Kit T7高产量RNA合成试剂盒优化转录反应体系，利用T7 RNA聚合酶，以T7启动子序列为模板的线性双链DNA，以NTPs为底物控制启动子下游DNA序列，高效合成单链RNA。在转录过程中，修饰过的核苷酸可以加入底物中制备生物素或染料标记RNA。 该试剂盒可合成长转录本和短转录本，1 μg DNA模板输入可产生100 ~ 200 μg的RNA。转录合成的RNA可用于各种下游应用，如RNA结构和功能研究、RNase保护、探针杂交、RNAi、显微注射和体外翻译等。 产品信息：
组分信息：
反应体系（仅供参考）：
注意:反应在室温下进行。由于10×转录缓冲液中含有亚精胺，亚精胺浓度过高会导致DNA模板在低温下沉淀。 应用： 体外RNA合成 存储： 干冰运输。-20℃保存，有效期两年。 注意: 1. 注意不要在反应系统中混入RNase。 2. 实验设备(如:移液器尖端、产品管等)应严格使用RNase Free产品。 3.为了您的安全与健康，请穿白大褂，戴一次性手套。 4. 仅供研究使用! 常见问题解答： 1. 转录产量低 模板的质量与产量密切相关。试验组的产量显著低于对照组，可能的原因有：①实验模板含有抑制成分；模板有问题。 建议：①重新纯化模板；②确定模板定量及其完整性；③延长反应时间；④增加模板输入量；⑤尝试其他启动子和RNA聚合酶。 2. 短转录产量低 短转录起始片段会抑制该反应。当转录产物小于100 nt时，延长反应时间至4-8 hs或增加模板量至2 μg均可提高RNA产量。 3.RNA转录长度大于预期 如果电泳显示产物条带大于预期条带，可能的原因是：①质粒模板可能没有完全线性化；②感觉链3’端结构突出；③RNA具有未完全变性的二级结构。 建议：①检查模板是否完全线性化，必要时进行额外线性化；②选择合适的限制性内切酶，避免3'外翻，或使用Klenow Fragment /T4 DNA聚合酶完成转录后再继续；③用变性凝胶检测RNA产物。 4. RNA转录长度低于预期 如果电泳显示产物条带小于预期大小，可能的原因是：①模板中含有类似于T7 RNA聚合酶的终止序列；②模板中GC含量较高。 建议：①降低反应温度(如30℃)。有时降低温度可以增加转录长度，但会降低产量。或者尝试不同的RNA聚合酶进行转录；②若模板GC含量较高，可采用42℃转录，或添加SSB以增加产量和转录长度。 5. 转录产物的电泳拖尾 电泳过程中出现拖尾现象。可能原因：①实验操作过程中被RNase污染；②RNase污染DNA模板。 建议:①使用不含RNase的移液针尖和EP管，佩戴一次性乳胶手套和口罩，所有试剂均使用不含RNase的H2O制备。②重新纯化模板DNA。 相关推荐： SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (S1 Subunit, His Tag) SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Spike Protein (RBD, mFc Tag) 重组TEV蛋白酶 Recombinant TEV Protease 重组SUMO蛋白酶 Recombinant SUMO Protease 更多产品需求，请联系上海惠诚生物！ 全国统一服务热线：021- 60496554 24小时手机服务: 13917250134（同微信）QQ：1715451510 技术支持：18901901484(同微信) QQ:3146426784 Email：info@e-biochem.com |
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